Kraujo grupių nustatymo pagal ABO sistemą tvarkayra identifikuoti antigenus A ir B eritrocituose, naudojant standartinius antikūnus, ir agliutininų naudojimą plazmoje arba kraujo serume, analizuojant standartinėmis raudonųjų kraujo kūnelių. Ši technika buvo sukurta XX a. Pradžioje ir vis dar aktyviai naudojama medicinoje. Antigenų A ir B nustatymas yra susijęs su anti-A ir anti-B zeolitonais.

Pagrindinės sąvokos

Donorus visada lemia ne tik antigenaieritrocituose, bet ir serume (plazmoje) agliutininų, naudojant standartinius eritrocitus. Venų kraujas naudojamas kaip biomaterialas. Prieš pradedant testą, jūs turite atsisakyti riebaus maisto per dieną prieš bandymą ir nerūkyti pusvalandyje prieš bandymą. Kraujo grupes nustato du kartus: pirmiausia gydymo skyriuje, kur medžiaga yra nuimama, o vėliau patvirtinama atlikus tyrimą laboratorijoje.

kraujo grupės nustatymas išvengiama kryžiaus keliu

Kraujo grupių apibrėžimas pagal ABO sistemą yrapagrindinis testas, naudojamas transfusiologijoje. Be to, kai kuriose gyvūnuose, pavyzdžiui, šimpanzėse, gorilose ir bonobose, panaši kraujo grupių sistema.

Istorija atradimo

Moksleivyje yra visuotinai pripažintas požiūrisnustatymo būdas kraujo grupės ABO sistemos buvo atrasta pirmą kartą pagal Karl Landsteiner, Austrijos mokslininko, 1900 m. Tada jis aprašė savo darbe tris antigenų tipus. Per trisdešimt metų jis buvo apdovanotas Nobelio premija medicinoje ir fiziologijoje. Atsižvelgiant į tai, kad tarp mokslininkai nebuvo artimi ryšiai, o vėliau nustatyta, kad Čekijos gydytojas Janas Jansky serologiniai nepriklausomai nuo tyrimų Karl Landsteiner pirmasis aprašė keturias grupes žmogaus kraujo, bet jo tyrimai nebuvo žinomas plačiajai auditorijai. Šiuo metu ji yra klasifikacija sukūrė J. Jansky, naudojamas Rusijoje ir buvusiose sovietinėse respublikose. JAV, WL Moss sukūrė panašų darbą 1910 m.

kraujo grupavimo technika

Kraujo grupių nustatymo metodas pagal ABO sistemą naudojant tsoliklonovą

Kraujo grupę reikia nustatyti patalposegeras apšvietimas, kurio temperatūra svyruoja nuo 15 iki 25 laipsnių Celsijaus, nes nukrypimai nuo šios normos gali turėti įtakos tyrimo rezultatams. Paciento inicialai ir pavardė parašyta ant plokštelės arba plokštės. Iš kairės į dešinę ar aplink apskritimą taikomas standartinis grupių aprašymas (O (I), A (II), B (III)). Po jų atitinkami serumai dedami lašai atskirų pipetės kiekvienai rūšiai. Tada į juos įtraukiamas paciento kraujas. Mokslinė medžiaga paimta iš ausies ar piršto. Tam reikia nustatyti kraujo grupę pagal ABO sistemą.

Erythrocytes,kurie yra vamzdeliuose po krešulių formų. Tai būtina, kad serumo suma buvo didesnė nei kraujo sumą pridėtinės dešimt kartų. Po to lašai mišrią stikline lazdele (atskirai kiekvienam iš jų). Per penkias minutes švelniai pasisukite plokštelę, stebėdami hemagliutinacijos reakcijos atsiradimą. Jis nustatė, kad yra maži raudoni guzai, tada sujungti į didesnes. Šiuo metu serumas beveik visiškai praranda spalvą.

Siekiant pašalinti klaidingą hemagliutinacijąpaprastas eritrocitų klijavimas, po trijų minučių reikia pridėti vieną lašą fiziologinio tirpalo ir patikrinti, ar agliutinacija išlieka. Jei taip, tai tiesa. Visa, kraujo grupių apibrėžimas pagal ABO sistemą yra baigtas.

kraujo grupių apibrėžimas dėl sistemos išvengimo

Rezultatų interpretavimas

Dėl to gali būti keturios reakcijos:

  • nėra jokio serumo agliutinacijos - pirmoji O (I) grupė;
  • reakcija pasireiškė serumu I (ab) ir III (a) - antroji grupė A (II);
  • agliutinacija pasireiškia serume I (ab) ir II (b) - trečiąja B (III) grupe;
  • jei reakcija vyksta su trimis serumaisBūtina atlikti papildomą procedūrą su standartiniais AB (IV) grupės reagentais; jei tokiu lašeliu nėra agliutinacijos, galime manyti, kad tai ketvirta kraujo grupė AB (IV).

Išreiškiamas Rh faktoriaus metodas

Kraujo grupių nustatymo pagal ABO sistemą metodas vienu metu nustato Rh faktorių (Rh).

Plokščio paviršius iš anksto drėkinamas irjie rašo apie tai "kontrolinis serumas" ir "antiresus serumas". Tada po užrašais dedamas vienas ar du lašai reikiamų reagentų, o jiems pridedama analizuota medžiaga. Norėdami tai padaryti, taip pat galite naudoti kraują iš piršto (tokiu pačiu kiekiu kaip ir serumo tūrį) arba raudonųjų kraujo kūnelių, likusių vamzdžio apačioje po krešulio atsiradimo (pusė serumo tūrio). Galutinio rezultato medžiagos pasirinkimas neturi įtakos. Tada kraujas ir serumas sumaišomi su sausu stikliniu lazdele, po to jie laukia, kol reakcija vyks penkias minutes. Norint pašalinti klaidingus rodmenis, po trijų ar keturių minučių pridedamas izotoninis natrio chlorido tirpalas (tik keli lašai). Kraujo grupės nustatymas pagal ABO ir Rh sistemą yra labai dažnas.

algoritmas, skirtas kraujo grupei nustatyti naudojant "avo system"

Jei eritrocitų agliutinacija pilama suserumas pasireiškia, tai rodo teigiamą rūsio kraują. Remiantis statistika, Rh + pasitaiko 85% pasaulio gyventojų. To trūkumas leidžia mums kalbėti apie Rh-neigiamą priklausomybę. Jei kontroliniame serume pasirodė agliutinacija, tai tapo netinkama. Deja, algoritmas kraujo grupei nustatyti pagal ABO sistemą ne visada puikiai veikia.

Kokios klaidos gali būti padarytos naudojant šią techniką?

Netikslumai nustatant tam tikrai grupei priklausantį kraują priklauso nuo šių priežasčių:

  • Techninis.
  • Biologinis kraujo specifiškumas.
  • Nepakankamas standartinių serumų ir eritrocitų pobūdis.

Techninės klaidos

Galimos klaidos nustatant ABO sistemos kraujo grupę kryžminiu būdu:

  • Netinkamas serumas ant plokštelės.
  • Netinkamos medžiagos kiekybinės proporcijos.
  • Nepakankamai švarių plokščių arbaplokštės, kurios liečiasi su kraujo (kiekvieno serumo turėtų būti rinktų atskirą pipete būti išplauta su natrio chlorido (0,9% koncentracijos) tirpalo).
  • Neteisingas analizuojamos medžiagos įrašas.
  • Laiko, kurio reikia laikytis, nesilaikymasatsiradimo agliutinacijos - paskubėkite ir atsižvelgti į atsakymą į penkių minučių pabaigos neturėtų būti, nes kraujyje gali būti blyškios agliutinogeno. Perederzhivat pat nėra verta, nes lašai gali išdžiūti su kraštų ir sukelti klaidingą išvadą. Svarbu vadovautis kraujo grupės nustatymo taisyklėmis pagal ABO sistemą.
    kraujo grupių nustatymas naudojant standartinius serumus
  • Klaidingas centrifugavimas taip pat gali sukelti klaidingą rezultatą.
  • Oro temperatūra viršija leistinąveikia agliutinacijos nebuvimą. Norint išvengti tokių klaidų, reikia naudoti specialų serumą, skirtą dirbti karštame klimate. Nustatykite kraujo grupes ant plokštelės ar plokštelės, kurios išorinis paviršius patenka į šaltu vandeniu.

Biologinės specifiškumo klaidos

Klaidos, susijusios su analizuojamo kraujo biologiniu specifiškumu, yra suskirstytos į du tipus.

  • Priklauso nuo raudonųjų kraujo kūnelių savybių.
  • Klaidos, susijusios su serumo biologinėmis savybėmis.

Pažiūrėkime apie kiekvieną rūšį išsamiau.

Priklauso nuo raudonųjų kraujo kūnelių savybių

  • Vėlyvas agliutinacijos dėl "silpnų"eritrocitų ir antigenų formos. Siekiant išvengti klaidų, būtina nustatyti donorų ir recipientų kraujo grupę, naudojant standartinius eritrocitus. Nustatyti agliutogeną A2 Reikėtų iš naujo ištirti kitų tipų reagentus ir kitus indus, didinant reakcijos įrašymo laiką.
  • "Panaglutinavimas" ("autoaglutinavimas") - įgūdiskraujas, rodantis tą pačią nespecifinio pobūdžio reakciją su visais serumais, įskaitant ir savo. Po penkių minučių tokio agliutinacijos aštrumas silpnėja, nors tai turėtų sustiprėti. Panašūs atvejai pasitaiko vėžiu sergantiems pacientams, sudegė ir kt. Kaip kontroliuoti, būtina įvertinti agliutinacijos tirtų standartiniu serumu ketvirtojo grupės ir fiziologiniu tirpalu raudonųjų kraujo ląstelių išraiška. Kai "panaglutinacijos" kraujo grupė nustatoma trigubo raudonųjų kraujo ląstelių plovimo rezultatu. Jei jis nesuteikia norimo rezultato, būtina iš naujo tvora iš kraujo mėginio mėgintuvėlį pašildytas prieš procedūrą ir įdėti pavyzdį šaltame lauke, padėti išlaikyti 37 laipsnių Celsijaus temperatūra ir aukščiau. Tada jis turi būti pristatytas į laboratoriją, kurioje palaikoma aukščiau nurodyta temperatūra ir naudojama fiziologinė druska, plokštė ir reagentai.

kraujo grupės nustatymo sistemos vengimo taisyklės

  • Kartais analizuojamas kraujo krešulysyra išdėstytos kaip "monetos", ir jas galima laikyti agliutinatais. Jei pridedate du lašus izotoninio tirpalo ir atsargiai supurtote plokštelę, raudonieji kraujo kūneliai ima teisingą padėtį.
  • Neteisinga arba mišraus agliutinacija, pasireiškianti pacientams, sergantiems antrąja, trečiąja ir ketvirta grupėmis dėl kaulų čiulpų transplantacijos arba per pirmuosius tris mėnesius po kraujo perpylimo 0 (I).

Dėl serumo biologinių savybių

  • Atliekant įprastą bandymą kaip rezultatąankstesnis jautrinimas atskleidė antikūnus, turinčius skirtingą specifiškumą. Mums reikia jį nustatyti ir paimti raudonųjų kraujo kūnelių be antigeno, kurio imunizacija yra nustatyta, turinį. Gavėjas privalo parinkti suderintą donoro kraują atskirai.
  • Nėra antikūnų A ir B, kurie pasireiškia naujagimiams ir pacientams, sergantiems humoralinio imuniteto priespauda.
  • Formuojant "monetas" anomaliosrezultatas turi būti patvirtintas imant standartines pirmosios grupės raudonųjų kraujo kūnelių. Natrio chlorido tirpalas ir plokštės tempimas padeda atskirti tikrus agliutinatus ir "monetas".
    kraujo grupių nustatymas pagal avo sistemą naudojant tsolibonus

Klaidos, susijusios su žemesnių standartinių eritrocitų ir serumų vartojimu

Silpni serumai, kurių galiojimo laikas yra trumpesnis arba kurio titras yra mažesnis nei 1:32, gali inicijuoti silpną ir vėlyvąją agliutinaciją. Tokių reagentų naudojimas yra nepriimtinas.

Netinkamų standartinių raudonųjų kraujo kūnelių naudojimasarba išrūgų, paruoštų nesteriliomis sąlygomis ir išlaikyta nepakankamai laipsniu, sukelia nespecifinio "bakterinio" agliutinacijos atsiradimą.

Yra daug populiarių prielaidų apieABO sistemos kraujo grupės, kurios atsirado iškart po jo aptikimo įvairiose pasaulio kultūrose. Pavyzdžiui, praėjusio amžiaus 30-aisiais Japonijoje ir kai kuriose kitose šalyse teorija, susiejanti kraujo grupę su vienu ar kitu asmeniu, įgijo populiarumą. Panašios teorijos yra populiarus šiandien.

Taip pat yra nuomonės, kad asmuo, kuris turi A grupę, patiria sunkų pagirimą, O yra susijęs su gerais dantimis, o A2 grupė - aukščiausią IQ lygį. Tačiau tokie teiginiai nėra moksliškai įrodyti.

Mes ištyrėme kraujo grupių apibrėžimą, naudojant ABO sistemą, naudojant standartinius serumus.

</ p>